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2020版中國藥典新增檢測項目——聚乙二醇分子量分布測定

更新時間:2019-10-24 點擊次數(shù):7939

新增項目

近在瀏覽國家藥典委員會網(wǎng)站的時候,驚奇的發(fā)現(xiàn)聚乙二醇300,400,1000……全部的聚乙二醇品種藥典方法都要修訂了!在瀏覽了公示方法,發(fā)現(xiàn)原來是新增了一個項目,從2020版藥典開始要標明重均分子量及分子量分布系數(shù)的標示值(按所附測定方法測定),那各位小伙伴了解分子量及分子量分布測定方法嗎?這里就給大家詳細講講。

 

2020版中國藥典征求意見稿之分子量及分子量分布測定方法

分別稱取聚乙二醇600、聚乙二醇1000、聚乙二醇4000、聚乙二醇7000、聚乙二醇10000分子量對照品適量,加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含2mg的溶液作為對照品溶液。稱取樣品適量,加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含2mg的溶液作為供試品溶液。照分子排阻色譜法(通則0514)測定,采用適宜分離范圍的凝膠色譜柱,以0.1mol/L硝酸鈉溶液(含0.02%抑菌劑)為流動相,示差折光檢測器;檢測器溫度35℃,柱溫35℃,取對照品溶液各100μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖,由GPC軟件計算回歸方程,線性相關系數(shù)R應不得小于0.99。取供試品溶液100μl,同法測定,根據(jù)回歸方程計算供試品的重均分子量及分子量分布。供試品的重均分子量應為標示值的90%~110%,分布系數(shù)應為產(chǎn)品標示值的90%~110%。

 

什么是分子排阻色譜法

分子排阻色譜法是根據(jù)待測組分的分子大小進行分離的一種液相色譜技術。分子排阻色譜法的分離原理為凝膠色譜柱的分子篩機制。色譜柱多以親水硅膠、凝膠或經(jīng)過修飾的凝膠如葡聚糖凝膠(Sephadex)和瓊脂糖凝膠(Sepharose)等為填充劑,這些填充劑表面分布著不同孔徑尺寸的孔,藥物分子進入色譜柱后,它們中的不同組分按其分子大小進入相應的孔內(nèi),大于所有孔徑的分子不能進入填充劑顆粒內(nèi)部,在色譜過程中不被保留,早被流動相洗脫至柱外,表現(xiàn)為保留時間較短;小于所有孔徑的分子能自由進入填充劑表面的所有孔徑,在色譜柱中滯留時間較長,表現(xiàn)為保留時間較長;其余分子則按分子大小依次被洗脫。

 

分子排阻色譜法應用案例

月旭科技Xtimate® SEC色譜柱是硅膠基質的分子排阻色譜柱,其色譜填料為高純度、具有良好穩(wěn)定性的硅膠微球表面鍵合親水性聚合物。月旭科技采用特殊的表面修飾技術,確保了該填料具有良好的穩(wěn)定性和批次重現(xiàn)性。

Xtimate® SEC色譜填料采用*的化學鍵合技術,在硅膠表面鍵合了親水性聚合物以及親水性二醇基官能團,雙重鍵合機制使水溶性高分子聚合物蛋白、生物酶、多肽等生物樣品的非特異性吸附極小,因而可廣泛應用于水溶性聚合物及生物大分子的分離和測定。

月旭科技采用Xtimate® SEC-300 (7.8*300mm,5μm)兩根色譜柱串聯(lián)的方式成功分離檢測聚乙二醇40k,20k,12k,5k含量。

色譜柱:月旭Xtimate® SEC-300 (7.8*300mm,5μm)兩根色譜柱串聯(lián)

流動相:高純水

檢測波長:示差檢測器

柱溫:柱溫40℃,檢測器40℃

流速:1.0ml/min

進樣量:20μl

 

 

各位小伙伴想了解更多有關分子排阻色譜法的相關信息,請咨詢評論。

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