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飼料中阿那曲唑的測(cè)定(農(nóng)業(yè)部1068號(hào)公告-5-2008)

更新時(shí)間:2020-08-12 點(diǎn)擊次數(shù):1120

 

適用范圍

適用于飼料中阿那曲唑的檢測(cè)。(本實(shí)驗(yàn)樣品采用復(fù)合飼料)

參考標(biāo)準(zhǔn):《農(nóng)業(yè)部1068號(hào)公告-5-2008 飼料中阿那曲唑的測(cè)定 高效液相色譜法》。

 

提取步驟

精QUE稱(chēng)取5g樣品置于50mL的螺口尖底離心管。

1)加入10mL水,搖勻,靜止10min,加入10mL提取劑,振蕩數(shù)秒,放氣,再次震蕩,放氣,超聲10min,4000rpm下離心10min,移取上清液;

2)再次加入10mL提取劑,振蕩數(shù)秒,放氣,再次震蕩,放氣,超聲10min,4000rpm下離心10min,移取上清液,合并上清液,取5mL上清液置于15mL離心管中,在40℃下氮吹至干,用2mL流動(dòng)相C溶解待凈化。

 

SPE凈化步驟

SPE柱:月旭Welchrom® P-SCX;

規(guī)格:60mg/3mL;

活化:依次3mL甲醇,3mL水活化,棄去;

上樣:待凈化液全部上樣,控制流速,不宜過(guò)快,棄去;

淋洗:依次3mL0.1mol/L鹽酸溶液,5mL甲醇,棄去;

洗脫:精QUE移取4mL的5%氨化甲醇洗脫,抽干并收集于15mL離心管中;

復(fù)溶:洗脫液于40℃水浴氮吹干,用流動(dòng)相C定容至1mL,經(jīng)0.22μm有機(jī)濾頭,供液相檢測(cè)。

注:流動(dòng)相C:300mL乙腈加水定容至1000mL,在加入5mL磷酸(乙腈-水-磷酸=30:70:0.5)

 

色譜條件

色譜柱:月旭Ultimate® XB-C18,4.6×250mm,5μm;

流動(dòng)相:A-水,B-甲醇,C-見(jiàn)2-4(梯度見(jiàn)表1);

流速:1.000mL/min;

柱溫:30℃;

進(jìn)樣量:20μL;
檢測(cè)波長(zhǎng):220nm。

 

 

色譜圖或者加標(biāo)回收率結(jié)果

 

 

 

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